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人ELISA檢測試劑盒免費代測

更新時間:2024-07-05

簡要描述:

人ELISA檢測試劑盒免費代測
上海研尊生物長期專業(yè)供應ELISA試劑盒,產(chǎn)品種類齊全,包括人、大小鼠、牛羊馬猴魚等各種種屬的ELISA試劑盒。本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本待測物質(zhì)水平。所有試劑盒提供產(chǎn)品檢測報告和精準的數(shù)據(jù)。
產(chǎn)品詳細說明書:聯(lián)系銷售人員獲取說明書

型號:人ELISA試劑盒48T/96T點擊量:2108
品牌其他品牌供貨周期現(xiàn)貨
應用領域醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),制藥

人ELISA檢測試劑盒免費代測

用途
該試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿或其他相關(guān)生物液體中濃度。
 
 
檢測原理
本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法。用抗體包被于酶標板上,實驗時樣品或標準品中的抗原會與包被抗體結(jié)合,游離的成分被洗去。依次加入生物素化的抗體和辣根過氧化物酶標記的親和素。抗體與結(jié)合在包被抗體上的抗原結(jié)合、生物素與親和素特異性結(jié)合而形成免疫復合物,游離的成分被洗去。加入顯色底物(TMB),TMB在辣根過氧化物酶的催化下呈現(xiàn)藍色,加終止液后變成黃色。用酶標儀在450nm波長處測OD值,抗原濃度與OD450值之間呈正比,通過繪制標準曲線計算出樣品中指標的濃度。
 

反應類型夾心法
規(guī)格96T
反應時間4.5h
反應性通用
檢測方法Colormetric
靈敏度檢測下線除以10
樣本體積100μL
樣本類型血清、血漿或其他相關(guān)生物液體
特異性可檢測樣本中的指標,且與其它相關(guān)蛋白無明顯交叉反應
重復性板內(nèi),板間變異系數(shù)均<10%

 
樣品活化方法
生物樣品中的通常以無活性的形式存在,在檢測指標活性前必須進行活化處理。
活化方法如下:
血清、血漿: 280 μL標準品&樣品稀釋液中加入40 μL樣品,混勻,加入40 μL活化試劑1,室溫孵育10分鐘。再加入40 μL活化試劑2,混勻后立即檢測。
注意:樣品被稀釋了10倍!
細胞培養(yǎng)上清:20 μL標準品&樣品稀釋液中加入100 μL樣品,混勻,加入40 μL活化試劑1,室溫孵育10分鐘。再加入40 μL活化試劑2,混勻后立即檢測。
注意:樣品被稀釋了2倍!
組織勻漿:1960 μL標準品&樣品稀釋液中加入40 μL樣品,混勻后檢測。
注意:樣品被稀釋了50倍!
 
精密度
板內(nèi)精密度:低濃度樣本,中濃度樣本和高濃度樣本分別在1塊板子上檢測20次。板間精密度:低濃度樣本,中濃度樣本和高濃度樣本分別在3塊板子上檢測20次。

 批內(nèi)變異系數(shù)批間變異系數(shù)
樣本123123
數(shù)量202020202020
平均值( MERGEFIELD 單位ng/mL)0.411.074.960.471.254.24
標準差0.020.050.220.030.060.2
變異系數(shù) (%)4.884.674.436.384.84.72

 
回收率
分別往5個不同樣本中添加已知濃度的目標蛋白,做回收實驗,得出回收率范圍和平均回收率。

樣本類型回收率范圍 (%)平均回收率 (%)
血清(n=5)94-110102
血漿(EDTA)(n=5)90-10296
細胞上清(n=5)95-10698

 
線性
分別往5個樣本中添加已知濃度的目標蛋白,做回收實驗,得出回收率范圍及平均回收率。將5個樣本分別稀釋2倍,4倍,8倍,16倍做回收實驗,得出回收率范圍及平均回收率。

  血清(n=5)血漿(EDTA)(n=5)細胞上清(n=5)
1:2回收率范圍(%)99-10895-10592-104
平均回收率(%)10510297
1:4回收率范圍(%)95-10990-10097-105
平均回收率(%)10296100
1:8回收率范圍(%)89-10389-10496-108
平均回收率(%)9797102
1:16回收率范圍(%)88-10298-10892-105
平均回收率(%)94104100

 
試劑盒組成及保存
未拆封的試劑盒可在4℃保存一周;如果一周以后才使用試劑盒,請拆開試劑盒按照下表中的條件分別保存各組分。

試劑盒組成48孔配置96孔配置
說明書1份1份
封板膜2片2片
密封袋1個1個
酶標包被板1×481×96
標準品0.3ml×6管0.3ml×6管
酶標試劑5 ml×1瓶10 ml×1瓶
樣品稀釋液3 ml×1瓶6 ml×1瓶
顯色劑A液3 ml×1瓶6 ml×1瓶
顯色劑B液3 ml×1瓶6 ml×1瓶
終止液3 ml×1瓶6 ml×1瓶
20×濃縮洗滌液15ml×1瓶25ml×1瓶
試劑盒組成48孔配置96孔配置
說明書1份1份
封板膜2片2片
密封袋1個1個

說明:所有試劑瓶蓋須旋緊以防止蒸發(fā)和微生物的污染。
試劑體積以實際發(fā)貨版說明書為準。相關(guān)試劑在分裝時會比標簽上標明的體積稍多一些,請在使用時量取而非直接倒出。
 
人ELISA檢測試劑盒免費代測
操作步驟
1. 標準品的加樣:設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;。
2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3. 加酶:每孔加入酶標試劑100μl,空白孔除外。
4. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育60分鐘。
5. 配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用。
6. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
7. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘. 
8. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
9. 測定:以空白孔調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。
 
試驗所需自備物品
1. 酶標儀(450nm波長濾光片)
2. 高精度移液器,EP管及一次性吸頭:0.5-10 μL, 2-20 μL, 20-200 μL, 200-1000 μL
3. 37℃恒溫箱,雙蒸水或去離子水
4. 吸水紙

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