動(dòng)物ELISA檢測試劑盒免費(fèi)代測

用途
該試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿或其他相關(guān)生物液體中濃度。

 檢測原理
本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法。用抗體包被于酶標(biāo)板上，實(shí)驗(yàn)時(shí)樣品或標(biāo)準(zhǔn)品中的抗原會(huì)與包被抗體結(jié)合，游離的成分被洗去。依次加入生物素化的抗體和辣根過氧化物酶標(biāo)記的親和素?？贵w與結(jié)合在包被抗體上的抗原結(jié)合、生物素與親和素特異性結(jié)合而形成免疫復(fù)合物，游離的成分被洗去。加入顯色底物(TMB)，TMB在辣根過氧化物酶的催化下呈現(xiàn)藍(lán)色，加終止液后變成黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長處測OD值，抗原濃度與OD450值之間呈正比，通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出樣品中指標(biāo)的濃度。
 

 
樣品活化方法
生物樣品中的通常以無活性的形式存在，在檢測指標(biāo)活性前必須進(jìn)行活化處理。
活化方法如下：
血清、血漿： 280 μL標(biāo)準(zhǔn)品&樣品稀釋液中加入40 μL樣品，混勻，加入40 μL活化試劑1，室溫孵育10分鐘。再加入40 μL活化試劑2，混勻后立即檢測。
注意：樣品被稀釋了10倍！
細(xì)胞培養(yǎng)上清：20 μL標(biāo)準(zhǔn)品&樣品稀釋液中加入100 μL樣品，混勻，加入40 μL活化試劑1，室溫孵育10分鐘。再加入40 μL活化試劑2，混勻后立即檢測。
注意：樣品被稀釋了2倍！
組織勻漿：1960 μL標(biāo)準(zhǔn)品&樣品稀釋液中加入40 μL樣品，混勻后檢測。
注意：樣品被稀釋了50倍！
 
精密度
板內(nèi)精密度:低濃度樣本,中濃度樣本和高濃度樣本分別在1塊板子上檢測20次。板間精密度:低濃度樣本,中濃度樣本和高濃度樣本分別在3塊板子上檢測20次。

 
回收率
分別往5個(gè)不同樣本中添加已知濃度的目標(biāo)蛋白，做回收實(shí)驗(yàn)，得出回收率范圍和平均回收率。

 
線性
分別往5個(gè)樣本中添加已知濃度的目標(biāo)蛋白，做回收實(shí)驗(yàn)，得出回收率范圍及平均回收率。將5個(gè)樣本分別稀釋2倍，4倍，8倍，16倍做回收實(shí)驗(yàn)，得出回收率范圍及平均回收率。

 
試劑盒組成及保存
未拆封的試劑盒可在4℃保存一周；如果一周以后才使用試劑盒，請拆開試劑盒按照下表中的條件分別保存各組分。

說明：所有試劑瓶蓋須旋緊以防止蒸發(fā)和微生物的污染。
試劑體積以實(shí)際發(fā)貨版說明書為準(zhǔn)。相關(guān)試劑在分裝時(shí)會(huì)比標(biāo)簽上標(biāo)明的體積稍多一些，請?jiān)谑褂脮r(shí)量取而非直接倒出。
 

動(dòng)物ELISA檢測試劑盒免費(fèi)代測
操作步驟
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的加樣：設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；。
2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。
3. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑100μl，空白孔除外。
4. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育60分鐘。
5. 配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用。
6. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
7. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘. 
8. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
9. 測定：以空白孔調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
 
試驗(yàn)所需自備物品
1. 酶標(biāo)儀(450nm波長濾光片)
2. 高精度移液器，EP管及一次性吸頭：0.5-10 μL, 2-20 μL, 20-200 μL, 200-1000 μL
3. 37℃恒溫箱，雙蒸水或去離子水
4. 吸水紙

我司試劑盒優(yōu)勢體：

品種齊全 ： 可以檢測人、小鼠、大鼠和豬的各種細(xì)胞因子

操作簡單 ： 大多數(shù)試劑盒可以在3小時(shí)內(nèi)完成檢測

節(jié)約樣品 ： 絕大多數(shù)試劑盒的單孔樣品量只需50μl

應(yīng)用廣泛 ： 適用于細(xì)胞培養(yǎng)上清液、血清、胞漿和尿液等多種樣品

包裝多樣 ： 除了1塊板的包裝，很多品種還提供2塊板和5塊板的經(jīng)濟(jì)裝

超級靈敏 ： 有些試劑盒采用先進(jìn)檢測技術(shù)，靈敏度高

特異性高 ： 進(jìn)行了廣泛的非特異性排查，避免了由于交叉反應(yīng)和干擾導(dǎo)致的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)誤差

我司有專業(yè)技術(shù)團(tuán)隊(duì)規(guī)范性操作，技術(shù)嚴(yán)格，質(zhì)量保證，無效果直接退款退貨，我們優(yōu)質(zhì)低價(jià)，讓新老客戶放心和稱心的科研產(chǎn)品，從品質(zhì)到價(jià)格到售后，在國內(nèi)我們更專業(yè)，更具優(yōu)勢，歡迎訂購！上海研尊生物公司是國內(nèi)有名的科研抗體試劑盒供應(yīng)商生產(chǎn)商。

公司主營業(yè)務(wù)：

試 劑 盒 ：  elisa試劑盒、 酶聯(lián)免疫試劑盒、試劑盒、免疫組化試劑盒、檢測試劑盒、分子生物學(xué)試劑盒

生化試劑： 原裝產(chǎn)品名稱進(jìn)口生化試劑、進(jìn)口原裝生化試劑、國產(chǎn)生化試劑

細(xì)     胞 ：  進(jìn)口細(xì)胞、國產(chǎn)腫瘤細(xì)胞、國產(chǎn)正常細(xì)胞。

抗     體 ： 免疫組化、免疫熒光、流式細(xì)胞檢測、免疫細(xì)胞化學(xué)